Молекулярная идентификация Haemadipsa rjukjuana (Hirudiniformes: Haemadipsidae) на острове Гагео, Корея

  1. Сохён Вон
  2. Bae Keun Park
  3. Бэк Джун Ким
  4. Хе Вон Ким
  5. Джун Гу Канг
  6. Тае Сео Парк
  7. Хонг Юл Сео
  8. Ye Eun
  9. Ки Гёнг Ким
  10. Джун Сок Че
  11. Аннотация
  12. ВСТУПЛЕНИЕ
  13. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  14. Выделение ДНК, амплификация ПЦР и секвенирование ДНК
  15. Таблица 1
  16. Филогенетические анализы
  17. Таблица 2
  18. РЕЗУЛЬТАТЫ
  19. ОБСУЖДЕНИЕ
  20. БЛАГОДАРНОСТЬ
  21. Сноски
  22. Рекомендации

Корейский паразитол. 2014 апр; 52 (2): 169–175.

, 1,2,1, †, 1,1,3,3,3,3 и , 1,2,1, †, 1,1,3,3,3,3 и   1 1

Сохён Вон

1Лаборатория ветеринарной медицины внутренних болезней, Научно-исследовательский институт ветеринарных наук и Колледж ветеринарной медицины, Сеульский национальный университет, Сеул 151-742, Корея.

Bae Keun Park

2 Колледж ветеринарной медицины, Национальный университет Чунгнам, Тэджон 306-764, Корея.

Бэк Джун Ким

1Лаборатория ветеринарной медицины внутренних болезней, Научно-исследовательский институт ветеринарных наук и Колледж ветеринарной медицины, Сеульский национальный университет, Сеул 151-742, Корея.

Хе Вон Ким

1Лаборатория ветеринарной медицины внутренних болезней, Научно-исследовательский институт ветеринарных наук и Колледж ветеринарной медицины, Сеульский национальный университет, Сеул 151-742, Корея.

Джун Гу Канг

1Лаборатория ветеринарной медицины внутренних болезней, Научно-исследовательский институт ветеринарных наук и Колледж ветеринарной медицины, Сеульский национальный университет, Сеул 151-742, Корея.

Тае Сео Парк

3Национальный институт биологических ресурсов, Инчхон 404-708, Корея.

Хонг Юл Сео

3Национальный институт биологических ресурсов, Инчхон 404-708, Корея.

Ye Eun

3Национальный институт биологических ресурсов, Инчхон 404-708, Корея.

Ки Гёнг Ким

3Национальный институт биологических ресурсов, Инчхон 404-708, Корея.

Джун Сок Че

1Лаборатория ветеринарной медицины внутренних болезней, Научно-исследовательский институт ветеринарных наук и Колледж ветеринарной медицины, Сеульский национальный университет, Сеул 151-742, Корея.

1Лаборатория ветеринарной медицины внутренних болезней, Научно-исследовательский институт ветеринарных наук и Колледж ветеринарной медицины, Сеульский национальный университет, Сеул 151-742, Корея.

2 Колледж ветеринарной медицины, Национальный университет Чунгнам, Тэджон 306-764, Корея.

3Национальный институт биологических ресурсов, Инчхон 404-708, Корея.

† Текущий адрес: Департамент климата и экологии, Национальный институт экологии, Seocheon 325-813, Корея.

Получено 2013 г. 31 августа; Пересмотрен в 2014 году, 13 января; Принято в 2014 году 24 января.

Это статья открытого доступа, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution ( http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/ ) который разрешает неограниченное некоммерческое использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальная работа должным образом процитирована. Эта статья была цитируется другие статьи в PMC.

Аннотация

Существует 60 видов кровососущих сухопутных пиявок, 50 видов, принадлежащих к семейству Haemadipsidae, и 10 видов, принадлежащих к семейству Xerobdellidae. Несмотря на недавние публикации о сухопутных пиявках, их таксономическая идентификация не до конца понятна, особенно на уровне видов. В Корее не было никаких исторических записей о земных пиявках, но недавно незарегистрированная кровососущая сухопутная пиявка была обнаружена в Гагедо (Остров), Корея. Молекулярный анализ был использован для идентификации видов 29 пиявок, собранных с Mt. Док-Сил в Гагео-до. Обычную ПЦР проводили с использованием ядерной 18S рРНК и генетического маркера субъединицы 1 (СО1) цитохрома с цитохрома с митохондриями. Последовательности 18S рРНК показали, что пиявки имеют 99,9% идентичность с Haemadipsa rjukjuana (обитает на Тайване), а последовательности CO1 показали, что пиявки очень близки к H. rjukjuana (обитает на Тайване). Последовательности CO1 были разделены на 2 категории: 1 с 94,6%, а другая с 94,3% сходством с H. rjukjuana L00115A (обитает на Тайване). Эта новая находка пиявки является первым рекордом в Корее. Кроме того, следует пересмотреть северный диапазон распространения кровососущей пиявки (Hirudiniformes: Haemadipisidae), включая Корею.

Ключевые слова: Haemadipsa rjukjuana , земная пиявка, кровеносный вектор

ВСТУПЛЕНИЕ

Пиявки представляют собой сегментированных червей, принадлежащих к типу Annelida. В отличие от других олигохет, таких как дождевые черви, у них есть 2 присоски. Большинство пиявок обитает в пресноводных средах, но может также находиться в наземных условиях. Они обычно делятся на 2 группы: Rhyncobdellae (пиявки без челюстей) и Arhynchobdellae (пиявки с челюстями). Челюстные пиявки известны своими привычками кормления кровью и могут быть найдены в наземных и водных средах. Бланшар [ 1 ] установили Haemadipsidae, чтобы отличить кровососущих наземных пиявок от их водных, кровожадных и хищных собратьев у Hirudininae [ 2 ]. Кроме того, кровососущие сухопутные пиявки делятся на 2 семейства, Haemadipisidae и Xerobdellidae [ 3 ] на основе их филогенетического анализа [ 2 , 4 , 5 , 6 ].

Наземные пиявки, принадлежащие к семейству Haemadipisidae, представляют собой наземных пиявок-гематофагов. Они демонстрируют высокое биоразнообразие, особенно в тропических регионах с высокой влажностью, таких как влажные джунгли и леса Южной Азии, Юго-Восточной Азии и Австралии. Гемадипса , тригнатный гемадипсид, наиболее распространен в Юго-Восточной Азии [ 7 ]. Несмотря на высокую распространенность во всех странах ареала, разнообразие и экология пиявок Haemadipsa были плохо изучены. Недавние исследования [ 7 , 8 ] были проведены для выявления пиявок Haemadipsa на уровне видов. Лай [ 8 ] определили новый вид с использованием штрих-кодирования ДНК, который широко используется [ 9 , 10 , 11 ]. Система штрих-кодирования ДНК для идентификации видов животных использует последовательности субъединицы 1 (СО1) цитохром с оксидазы в качестве генетического маркера [ 12 ]. Кроме того, в других исследованиях анализировались отдаленно связанные линии кровососущих наземных пиявок с использованием ядерной маркера 18S рРНК и 28S рРНК [ 2 ].

Присутствие Torix tagoi Oka, Hirudo nipponia Whitman 1886 и Whitmania pigra (Murada, 1936) впервые было зарегистрировано в Корее в первой половине 20-го века [ 13 ]. Кроме того, Glossiphonia weberi и Hemiclepsis japonica были зарегистрированы [ 14 ]. Однако они описали только пресноводные пиявки и не применили молекулярный анализ. Известно, что некоторые сухопутные пиявки живут на островах Кореи, особенно в Гагедо (Остров), но еще не подтверждены научными данными. Цель этого исследования - определить таксономический статус пиявок, недавно обнаруженных в Гагео-до, на основе молекулярного анализа. Это первый отчет о наличии наземных видов пиявок в Корее.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Учебный сайт и сбор образцов

В течение 25-28 июля 2011 года на горе было собрано 40 пиявок. Док-Сил (высота 639 м, восток 125 ° 07 ', северная широта 34 ° 04') на Гагедо, Шинан-гун (графство), Чолланам-до (провинция), Корея (). Остров расположен в юго-западной части города Мокпхо (136 км от Мокпхо), и его географические координаты находятся между N 34 ° 06 'и 35 ° 02' и между E 125 ° 05 'и 125 ° 09' (). Сбор пиявок выполняли, прогуливаясь по лесной тропинке, чтобы привлечь пиявок, и затем пиявки на ногах или других частях удаляли пинцетом как можно скорее (). Образцы были сохранены в 70% спирте для выделения ДНК (). ДНК, выделенную из 29 из 40 пиявок, использовали для ПЦР.

ДНК, выделенную из 29 из 40 пиявок, использовали для ПЦР

Гора Док-Сил (▴, высота 639 м) в Гагедо (Остров) (125 ° 7 "восточной долготы, 34 ° 4" северной широты), Корея. Гагедо находится в Шинан-гуне, Чолланам-до (провинция) и на самом юго-западном острове Кореи. Гора Док-Сил - самая высокая вершина Шинан-гун. (А) Географическая карта Азии. (B) Местоположение Мокпхо (•), Хойксан-до (⋆) и Гагео-до, Корея. Гагео-до находится в 136 км от Мокпхо и в 70 км от Хойксан-до. (C) Карта, показывающая топографию горы Гагедо и Док-Сил (▴).

(C) Карта, показывающая топографию горы Гагедо и Док-Сил (▴)

Наземные пиявки собраны в Гагео-до, Корея. (А) через 10 минут после подачи крови на ногу человека. (B) 30 минут после кормления на ноге человека. (C, D) 70% фиксированных алкоголем земных пиявок после кормления.

Выделение ДНК, амплификация ПЦР и секвенирование ДНК

Для лизиса тканей и выделения ДНК использовали набор DNeasy Blood & Tissue Kit (Qiagen, Hilden, Германия). Извлеченную ДНК хранили при -20 ℃. ПЦР-амплификации фрагментов гена 18S рРНК и COI проводили с использованием праймеров, перечисленных в [ 15 , 16 ]. ПЦР-амплификацию гена 18S рРНК проводили путем вложенной ПЦР. Первоначальную амплификацию ПЦР проводили с использованием праймеров A и B, получая фрагмент размером 1,8 т.п.н. Последующую амплификацию ПЦР проводили с использованием 2 наборов вложенных праймеров A и Y или C и B, чтобы получить 2 коротких перекрывающихся фрагмента ДНК длиной примерно 1,2 т.п.н. каждый. 15 ]. Все ПЦР проводились с использованием HiPi PCR PreMix (Eplis-Biotech Inc., City, Country) в общем объеме 20 мкл. Реакции амплификации состояли из 1 единицы / 4 мкл термостабильной ДНК-полимеразы HiPi в 250 мМ Трис-HCl (pH 9,0), 80 мМ (NH4) 2SO4, 10% ДМСО, 8,75 мМ MgCl2, 0,05% бромфенолового синего, 12% глицерина, стабилизатора, 0,5 мМ каждого праймера и 10-15 нг ДНК. Все реакции ПЦР проводили в термоциклере PTC-200 (MJ Research Inc., Ramsey, Minnesota, USA). Продукты амплифицированной ПЦР разделяли электрофорезом в 1,5% агарозном геле и визуализировали с помощью бромида этидия под визуализатором SL-20 Image (Seolin Scientific Co., Сеул, Корея).

Таблица 1

Нуклеотидные последовательности праймеров ПЦР и условия амплификации генов 18S рРНК и COI

Филогенетические анализы

Ампликоны ПЦР анализировали прямым секвенированием. Номера доступа в GenBank последовательностей генов 18S рРНК и генов COI, связанных с гемадипсоидными пиявками, перечислены в. Для последовательностей 18S рРНК 2 отдельных фрагмента (по 1,2 т.п.н. для каждого) были отредактированы и согласованы с использованием BioEdit версии 7.0.9.0 [ 17 ]. Все последовательности были отредактированы вручную по крайней мере 3 раза. Выравнивание последовательностей осуществляли с использованием MultiAlign [ 18 ]. Следовательно, 1,7 кб 18S рРНК и 649 пн последовательностей CO1 были использованы для идентификации видов и филогенетического анализа. Анализ последовательностей был сравнительно завершен с использованием опции Blast Search для последовательностей 18S рРНК и СО1 пиявок в базе данных GenBank. Филогенетические отношения между гаплотипами пиявок были реконструированы с использованием метода соседей (NJ) [ 19 ] по 2-параметрической (K-2-P) модели Кимуры [ 20 ]. В качестве ссылок соответствующие последовательности были выбраны из базы данных GenBank (). Кроме того, соответствующие последовательности (n = 8) были использованы для корня филогенетического дерева как outgroup (). Уверенность в оценочных отношениях была определена с использованием метода начальной загрузки [ 21 ] получены через 1000 повторов с той же моделью, что упоминалась выше. Как бутстрап-анализ, так и реконструкция филогении были проведены с использованием MEGA версии 4.0 [ 22 ].

Таблица 2

Места сбора и регистрационные номера GenBank, используемые для филогенетического анализа гемадипсоидных пиявок в этом исследовании

РЕЗУЛЬТАТЫ

Чтобы определить видовую идентичность и оценить генетические взаимоотношения сухопутных пиявок в Гагедо, из образцов пиявки были амплифицированы последовательности генов 18S рРНК длиной 1,8 т.п.н. и 710 п.н. Из 29 образцов 26 и 21 последовательность была получена для 18S рРНК и гена CO1 соответственно. Оставшиеся образцы не дали четких последовательностей или оказались другими видами, а не Haemadipsa spp. (данные не показаны).

Результаты ПЦР-амплификации генов COI и 18S рРНК из пиявки Гагео-до. (A) ампликоны ПЦР с геном COI (710 п.н.). (B) ампликоны гена 18S рРНК (1,2 т.п.н.). Из всей 18S рРНК размером 1,8 т.п.н. амплификации ПЦР проводили в 2 независимых частях, которые перекрывают друг друга длиной приблизительно 1,2 т.п.н .; М, Elpis, маркер 100 п.н .; 1, 2, 3 и 4; Gageo образец земли пиявки.

Для определения видовой идентичности сухопутных пиявок Gageo-do все последовательности пиявок были проверены с использованием поиска взрыва из базы данных GenBank. Результаты показали, что нуклеотидные последовательности 18S рРНК имеют 99,9% идентичность с изолятом H. rjukjuana HARY (из Тайваня, {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "HQ203097", "term_id": "316927143", "term_text": "HQ203097"}} HQ203097 ) Они отличались только 2 базовыми парами по 1706 б.п. Нуклеотид СО1 также показал сходную картину. Последовательности были разделены на 2 типа: H. rjukjuana CO1 тип A и CO1 тип B. Среди 21 приобретенной нами последовательности CO1 последовательности типа A были 13, а последовательности типа B - 8. Тип A и тип B показали 94,6% (614). / 649 п.н.) и 94,3% (612/649 п.н.) сходства с эталонной последовательностью H. rjukjuana L00115A (из Тайваня, {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "HQ322443", "term_id": "311335948", "term_text": "HQ322443"}} HQ322443 ,) соответственно.

rjukjuana L00115A (из Тайваня,   {type: entrez-nucleotide, attrs: {text: HQ322443, term_id: 311335948, term_text: HQ322443}} HQ322443   ,) соответственно

Филогенетическое древо, иллюстрирующее генетические взаимоотношения гемадипсоидных пиявок с использованием метода соединения соседей, реализованного в алгоритме Clustal X с Mega 4.0. Последовательности гена 18S рРНК Haemadipsa rjukjuana, полученные из Mt. Док-Сил в Гагео-до, Шинан-гун, Чолланам-до, Корея, по сравнению с предыдущими эталонными последовательностями. Жирные буквы - это последовательности, определенные в этом исследовании.

Жирные буквы - это последовательности, определенные в этом исследовании

Филогенетическое древо для гена COI, показывающее таксономический статус гемадипсоидных пиявок с использованием метода соединения соседей. Последовательности генов COI Haemadipsa rjukjuana, полученные из Mt. Док-Сил в Гагео-до, Шинан-гун, Чоллан-до, Корея. Жирные буквы - это последовательности, определенные в этом исследовании. H. rjukjuana Gageo 1 обозначает COI типа A, а H. rjukjuana Gageo 27 обозначает COI типа B.

Для оценки генетического родства сухопутных пиявок Gageo-do, нуклеотидные последовательности генов 18S рРНК и CO1 были независимо проанализированы с другими эталонными последовательностями, доступными в базе данных GenBank. Деревья Нью-Джерси наземной пиявки 18S рРНК и СО1 подтверждают, что H. rjukjuana является монофилетической в ​​одной кладе с высокими значениями начальной загрузки (,). Для гена 18S рРНК () генетическое расстояние ( P s) между H. rjukjuana Gageo и H. rjukjuana HARY составляло 0,1% (данные теперь показаны). Напротив, P s между H. rjukjuana HARY и H. sylvestris и между H. rjukjuana Gageo и H. sylvestris составляли 0,4 и 0,5% соответственно (данные не показаны). Для гена CO1 () P s между H. rjukjuana L00115A и H. limuma HACH составляет 14,6% (данные теперь показаны). Однако P s между H. rjukjuana L00115A и Gageo-do земляной пиявкой 1 или 27 составляли 5,6% и 6,0% соответственно (данные не показаны). Филогенетическое древо также выявило, что последовательности CO1 сухопутных пиявок Gageo-do имели самые близкие отношения с H. rjukjuana на Тайване.

ОБСУЖДЕНИЕ

Как правило, пиявки делятся на 2 группы: Rhynchobdellida Blanchard (без челюстей) и Arhynchobdellida Blanchard (с челюстями). Пиявки Архинчобделлид имеют мускулистую челюсть для кормления и классифицируются как Erpobdelliformes Caballero и разнообразные Hirudiniformes Caballero [ 23 ]. Hirudiniformes подразделяются на 5 семей; Americobdellidae Canallero, Cylicobdellidae Ringuelet, Haemadipsidae Blanchard, Haemopidae Richardson и Hirudinidae Whitman [ 21 , 24 ]. Оставшиеся кровососущие Hirudiniformes могут быть классифицированы в зависимости от предпочтения их среды обитания как полуводные Hirudinidae и наземные (или наземные) Haemadipsidae [ 21 ]. Также Сайвер [ 24 ] далее объединили Haemadipsinae с Haemadipisidae, чтобы создать единую семью, которая разделена на dougnathous (2-челюстная) и trignathous (3-челюстная) серия, и включала все виды наземных пиявок. Тринатные пиявки рода Haemadipsa Tennent (1859) широко распространены по всему Индийскому субконтиненту в Юго-Восточной Азии и вплоть до северо-восточной Азии [ 25 ].

Torix tagoi (Oka, 1925), H. nipponia Whitman 1886, W. pigra (Murada, 1936), Glossiphonia werevi и Hemiclepsis japonica были зарегистрированы в Корее [ 14 ]. Тем не менее, эти предыдущие исследования были сосредоточены на морфологических особенностях пресноводных пиявок, но не наземных пиявок [ 26 ]. Ранее было известно, что наземные пиявки населяют Гагео-до в Корее, но ни один из исследователей не выполнил свою таксономию. Это исследование задокументировало захват наземных пиявок на горе. Док-Сил Гагео-до и их идентификация на уровне вида. Гагедо - самый западный южный остров Кореи, расположенный над миграционными путями птиц, следующих из Юго-Восточной Азии в Сибирь. Общая площадь и длина береговой линии Гагео-до составляют 9,18 км2 и 22,0 км соответственно. Остров, состоящий из скал и вечнозеленых лесов, имеет морской климат. На Гагео-до нет метеостанции, и согласно метеорологической станции Хеуксан-до, которая находится ближе всего к Гагео-до (70 км), средняя температура составляет 3,3-6,0 ℃ зимой и 22-27 ℃ в течение летом. Среднегодовая температура составляет 13,6 ℃, а общее годовое количество осадков - 1126 мм. С мая по август много туманной погоды, и туман имеет тенденцию распространяться локально. В частности, гора Док-Сил (высота 639 м) в Гагедо является самой высокой горой в провинции Шинан-гун, и ее внутренний лес обычно очень влажный в течение всего года. Как правило, наземные пиявки, как известно, обитают в тропических регионах с высокой влажностью, и в связи с этим Mt. Док-Сил служит идеальной средой обитания для пиявок. Наземные пиявки на горе. Dock-Sil обладает внутренней и задней присоской и движется как чрезвычайно упругий червяк. Они сосут кровь человеческих ног в течение примерно 30 минут, после кормления кровью образуется кровоточащий рубец (). Их считали семейством Haemadipsidae, но предварительных данных, сопоставимых с другими пиявками, не было.

В результате анализа гена 18S рРНК пиявки Gageo-do (n = 28/29 пиявок) 26 последовательностей имели сходство на 99,9% с изолятом Haemadipsa rjukjuana HARY (из Тайваня, {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "HQ203097", "term_id": "316927143", "term_text": "HQ203097"}} HQ203097 ). Другие 2 последовательности были ближе к Orobdella tsushimensis (из Японии, {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "AB663653", "term_id": "371501288", "term_text": "AB663653"}} AB663653 , данные не показаны). В результате анализа гена CO1 (n = 24/29 пиявок) 21 был ближе всего к H. rjukjuana . 21 последовательность была далее разделена на 2 типа, Gageo 1 и Gageo 27, всего на 1 п.н. Оба гаплотипа имели сходство 94,6% или 94,3% с H. rjukjuana L00115A (из Тайваня, {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "HQ322443", "term_id": "311335948", "term_text": "HQ322443"}} HQ322443 ). Остальные 3 последовательности были похожи на O. tsushimensis (Япония, {"type": "entrez-nucleotide", "attrs": {"text": "AB679660", "term_id": "374429055", "term_text": "AB679660"}} AB679660 , данные не показаны). Для обоих генетических маркеров тот же результат был получен с использованием гена CO1. Филогенетические деревья также показали, что пиявки Gageo-do были ближе всего к H. rjukjuana (,). Неясно, когда кровожадные пиявки начинают жить на Гагедо, но возможная гипотеза состоит в том, что они были распространены из других регионов людьми (например, рыбаками или туристами) или животными (например, перелетными птицами). Однако для подтверждения этих гипотез необходимы дальнейшие исследования. Кроме того, согласно карте распространения Haemadipisidae (Borda and Siddall 2010), субраспределение рода Haemadipsa с тремя челюстями широко распространено по всему субконтиненту Индии в Юго-Восточную Азию и вплоть до Северо-Восточной Азии. Тем не менее, граница северо-восточной Азии выровнена до Японии. Согласно результатам этого исследования, северная граница должна быть расширена до Кореи.

Основным хозяином наземных пиявок Haemadipsa являются млекопитающие среднего или крупного размера, в первую очередь люди, включая людей. Мы должны попытаться определить виды животных, кровососущих пиявками. Кроме того, наземные пиявки Haemadipsa должны быть подтверждены независимо от того, играют ли они в качестве переносчика зоонозных патогенов.

В настоящем исследовании подтверждается наличие кровососущих наземных пиявок с высоким генетическим сходством с H. rjukjuana в Корее. Это первый отчет о кровавых пиявках (Hirudiniformes: Haemadipisidae) в Корее.

БЛАГОДАРНОСТЬ

Эта работа была поддержана Национальным институтом биологических ресурсов (1800-1844-301-260), Корея.

Сноски

У нас нет конфликта интересов, связанных с этим исследованием.

Рекомендации

1. Бланшар Р. Гирудины. Bollettino dei Musei Torino. 1896; 11: 1–24. [ Google ученый ] 2. Борда E, Oceguera-Figueroa A, Siddall ME. О классификации, эволюции и биогеографии наземных гемадипсоидных пиявок (Hirudinida: Arhynchobdellida: Hirudiniformes) Mol. Phylogenet Evol. 2008; 46: 142–154. [ PubMed ] [ Google ученый ] 3. Скет Б., Тронтель П. Глобальное разнообразие пиявок (Hirudinea) в пресной воде. Hydrobiol. 2008; 595: 129–137. [ Google ученый ] 4. Тронтель П., Скет Б., Стейнбрук Г. Молекулярная филогения пиявок: конгруэнтность ядерных и митохондриальных рДНК-данных и происхождение кровососания. J Zool Syst Evol Res. 1999; 37: 141–147. [ Google ученый ] 5. Борда Э., Сиддалл М.Е. Arhynchobdellida (Annelida: Oligochaeta: Hirudinida): филогенетические отношения и эволюция. Мол Филогенет Эвол. 2004; 30: 213–225. [ PubMed ] [ Google ученый ] 6. Кучера У., Пфайффер И., Эберманн Е. Европейская сухопутная пиявка: биология и таксономия на основе ДНК редкого вида, которому угрожает потепление климата. Naturwissenschaften. 2007; 94: 967–974. [ PubMed ] [ Google ученый ] 7. Ngamprasertwong T, Thirakhupt K, Panha S. Два новых вида наземных пиявок из Таиланда (Hirudiniformes: Haemadipsidae) Nat Hist J Chulalongkorn Univ. 2007; 7: 155-159. [ Google ученый ] 8. Лай Ю.Т., Накани Т, Чен Дж. Х. Три вида сухопутных пиявок из Тайваня, Haemadipsa rjukjuana comb.n., новый рекорд для Haemadipsa pocta Moore и обновленное описание зоопарков Tritetrabdella taiwana (Oka). 2011; 139: 1–22. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 9. Лай Ю.Т., Чанг Ч., Чен Дж.Х. Два новых вида Helobdella Blanchard, 1896 (Hirudinida: Rhynchocdellida: Glossiphoniidae) из Тайваня, с контрольным списком фауны Hirudinea острова. Zootaxa. 2009; 2068: 27–46. [ Google ученый ] 10. Сиддалл М.Е., Тронтель П., Утевский С.Ю., Нкаманы М., Макдональд К.С. Разнообразные молекулярные данные показывают, что имеющиеся в продаже лекарственные пиявки не являются Hirudo medicinalis. Proc Biol Sci. 2007; 274: 1481–1487. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 11. Белый А.Е., Вейсблат Д.А. Уроки пиявок: призыв к штрих-кодированию ДНК в лаборатории. Evol Dev. 2006; 8: 491-501. [ PubMed ] [ Google ученый ] 12. Hebert PD, Ratnasingham S, deWaard JR. Штрих-кодирование жизни животных: расхождение субъединицы 1 цитохром с оксидазы среди близкородственных видов. Proc Biol Sci. 2003; 270 (приложение 1): S96 – S99. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 13. Кан К.В. Лич. Сеул, Республика Корея: Академия учебников; 1995. р. 90. [ Google ученый ] 14. Пайк Е.И., Парк СР. Таксономическое исследование двух новых записей о пресноводных пиявках - Glossiphoniidae (Hirudinea: Rhynchobdellae) из Кореи. Jayeongwahagyeongunonmunjip-Daeguhyoseonggatollikdaehakgyo. 1992; 44: 497–502. [ Google ученый ] 15. Апакупакул К., Сиддалл М.Е., Бурресон Е.М. Более высокий уровень взаимоотношений пиявок (Annelida: Clitellata: Euhirudinea) основан на морфологии и последовательностях генов. Мол Филогенет Эвол. 1999; 12: 350–359. [ PubMed ] [ Google ученый ] 16. Folmer O, Back M, Hoeh W, Lutz R, Vrijenhoek R. ДНК-праймеры для амплификации митохондриальной субъединицы I цитохрома с оксидазы из разнообразных беспозвоночных метазоа. Мол Мар Биол Биотехнолог. 1994; 3: 294-299. [ PubMed ] [ Google ученый ] 17. Зал Т.А. BioEdit: удобная программа для анализа и выравнивания биологической последовательности для Windows 95/98 / NT. Symp. Nucleic Acids Ser. 1999; 41: 95–98. [ Google ученый ] 19. Сайто Н., Ней М. Метод смежности: новый метод восстановления филогенетических деревьев. Мол Биол Эвол. 1987; 4: 406-425. [ PubMed ] [ Google ученый ] 20. Кимура М.А. Простой метод оценки эволюционной скорости замены оснований посредством сравнительных исследований нуклеотидных последовательностей. J Mol Evol. 1980; 16: 111–120. [ PubMed ] [ Google ученый ] 21. Фельзенштейн Дж. Доверительные пределы филогении: подход с использованием бутстрапа. Эволюция. 1985; 39: 783–791. [ PubMed ] [ Google ученый ] 22. Тамура К., Дандли Дж., Ней Н., Кумар С. MEGA4: Программное обеспечение для молекулярно-эволюционного генетического анализа (MEGA), версия 4.0. Мол Биол Эвол. 2007; 24: 1596–1599. [ PubMed ] [ Google ученый ] 23. Борда Э. Систематика и биоразнообразие Arhynchobdellida (Oligochaeta: Hirudinida) с акцентом на эволюционную историю кровопускания наземных пиявок. Мичиган, США: ProQuest. Информационно-обучающая компания; 2007. с. 223. UMI Microform 3288963. [ Google ученый ] 24. Сайвер РТ. Биология и поведение пиявки: Том II. Питание, биология, экология и систематика. США: Oxford Science Publications, издательство Oxford University Press; 1986. с. 360. [ Google ученый ] 25. Borda E, Siddall ME. Понимание эволюционной истории индо-тихоокеанских кровопролитных наземных пиявок (Hirudinida: Arhynchobdellida: Haemadipsae) Invertebr Syst. 2010; 24: 456–472. [ Google ученый ] 26. Парк КХ, Ким Ч. Таксономические исследования на пресноводных пиявках (= Hirudinea) в Корее. Chungnam J Sci. 1989; 16: 149–158. [ Google ученый ] Статьи из Корейского журнала паразитологии предоставлены здесь любезно Корейским обществом паразитологии

ГОРЯЧАЯ ЛИНИЯ

(062) 348 60 00
(095) 210 57 42

Дед Мороз в офис Донецк

Дед Мороз на детском утреннике Донецк

Дед Мороз на дом Донецк

Новости

Телеканал Юнион в гостях у Морозко

Последние записи